霉形体支原体病的发生发展

霉形体病是霉形体属(支原体属,Mycoplasma)成员引起的人畜传染病的总称。霉形体是一类能够自行繁殖的、体积最小、构造最简单的原核生物,无细胞壁,具有高度多形性,在光镜下呈多形,能通过细菌滤器,大小为0.1~0.微米,介于细菌和病毒之间的一类微生物,有球形、球杆状或其他形状不等,在无细胞培养基中生长,菌落呈典型的油煎蛋状,由于能形成丝状与分枝形状,故称为支原体。

霉形体,世界上第一个人工培养成功的霉形体亚种是在年由法国的E.I.E.诺卡等从牛传染性胸膜肺炎病牛胸水中分离的。因此,霉形体过去曾称之为类胸膜肺炎微生物(pleuropneumonia-likeorganism,PPLO),年正式命名为支原体(mycoplasma)。为目前发现的最小的最简单的原核生物,基因数量为,支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体),以下通以支原体称呼论述霉形体的特性、发生与发展。

支原体(mycoplasma)广泛存在于人和动物体内,目前发现80多种,但大多不致病,一般能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸、能利用精氨酸的则不能分解葡萄糖,据此可把支原体分为两大类。各种支原体都有特意的表面抗原结构,很少有交叉反应,具有型特异性,应用生长抑制试验(Growthinhibitiontest.GIT)、代谢抑制试验(Metabolicinhinbitiongtest,MIT)等可鉴定支原体抗原,进行分型。对人致病的支原体主要有肺炎支原体(M-pneumonie,Mp)、解脲支原体(Ureaplasmaurealyticum,UU,分解尿素支原体)、人型支原体(M-humenis,MH)、生殖器支原体(M-genitalium.MG)等。对动物致病的主要有牛传染性胸膜肺炎、山羊传染性胸膜肺炎(又名牛肺疫)、猪地方性肺炎(又名猪喘病)、鸡毒霉形体(Mycoplasmagalliseplicum,缩写MG)、滑液霉形体(Mycoplasmasynoviae,缩写MS)和火鸡霉形体(Mycoplasmameleagridis,缩写MM)等等。支原体(mycoplasma)没有细胞壁,也不含有任何细胞壁成分,对渗透压敏感,而那些主要破坏细胞壁或抑制细胞壁成分合成的抗生素或抗菌药物如青霉素等,对支原体没有作用。革兰氏染色阴性,不易着色,常用吉姆沙(Giemsa)染色,染成淡紫色。细胞膜中胆固醇含量较多,约占6%,对维持细胞膜的完整性具有一定作用。细胞膜含甾醇,比其它原核生物的膜更坚韧。凡作用于胆固醇的物质(如二性霉素皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。支原体(mycoplasma)膜成分中有蛋白质和脂多糖抗原,其相应的抗体能抑制支原体的生长、代谢,并在补体的参与下裂解支原体。巨噬细胞、lgG及IgM对支原体均有一定的杀伤作用。支原体(mycoplasma)的基因组为一环状双链DNA,分子量小(仅有大肠杆菌1/5),合成与代谢有限,肺炎支原体的一端有特殊的末端结构(terminalstructure),能使支原体粘附于呼吸道粘膜上皮细胞表面,与致病性有关。支原体抵抗力较弱,对热、干燥敏感,对75%乙醇、煤酚皂溶液敏感,对红霉素、四环素、螺旋霉素、链霉素、卡那霉素等药物敏感,但对青霉素类的抗生素不敏感。支原体是好气和兼氧性厌氧菌,营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外一般要加入10-20%的人或动物血清,以提供支原体所需的胆固醇。适宜生长温度为5℃,最适PH7.8-8.0之间,低于PH7.0则死亡,但解脲支原体最适PH6.0-6.5,潮湿环境有利于支原体生长。大多数兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入5%二氧化碳生长更好。生长特点:缓慢。在琼脂含量较少的固体培养基上孵育2-天出现典型的“荷包蛋样”菌落,圆形,直径10-16um,核心部分较厚,向下长入培养基,周边为一层薄的透明区,此外,支原体还能在鸡胚尿囊膜或细胞培养物中生长。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是世界性难题。国内研究表明:95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆淄支原体(A.laidlawii),为牛源性;国外调查证明:大约有20多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上支原体。支原体致病性较弱,一般不侵入血液,但可通过黏附作用与宿主细胞结合,从细胞膜获取脂质和胆固醇,使细胞膜损伤。溶脲脲原体可分解尿素放出大量的氨,对细胞有毒害。支原体传播方式主要是水平传播和垂直传播。水平传播是带病鸡通过咳嗽、喷嚏或排泄物污染空气,惊呼道传染,极容易在一群鸡内通过空气传染全群,也可通过饲料和水源由消化道传染,交配也能引起接触感染,1只感染的鸡呼出的每升空气中会有8-20个支原体,在周围数米的鸡都会受到感染。在净化不彻底的情况下,污染种鸡通过种蛋垂直传播商品代雏鸡,受感染的弱雏排泄物以及呼出的带菌空气在通过水平传播引起其他雏鸡感染,这是鸡支原体病发生的主要原因。水平传播除了鸡体之间的传播外,车、人、鸟、犬、猫等媒介可机械性携带性传播支原体病。某些活疫苗中可能含有支原体,据报道,20%的新城疫I系苗中污染。一、牛传染性胸膜肺炎

又名牛肺疫,由丝状霉形体(支原体)的亚种所致的传染病。多见于牛、水牛、和牦牛。

在非洲和亚洲至少已有多年的历史。19世纪初流行于欧洲,又由欧洲传播到美洲、大洋洲等处。现已在许多国家被消灭,但部分地区仍有流行或发生,中国仅局限于一些边远牧区。

主要由飞沫传染。带菌牛是重要的传染源。

潜伏期平均为2~4周。

病程发展一般缓慢,偶有急性发作死亡的。

主要症状是咳嗽、鼻孔流出液体、体温40℃以上,死亡率高低不等。

从病肺中分离病原霉形体是最可靠的诊断方法。血清学检验有补体结合试验、琼脂扩散沉淀试验、玻片凝集试验和皮肤变态反应等方法。

可用疫苗注射预防。由霉形体所致的牛病还有由牛生殖道霉形体、牛霉形体和加拿大霉形体等所致的牛乳腺炎,以及由牛鼻霉形体所致的支气管肺炎等。

二、山羊传染性胸膜肺炎

由丝状霉形体(支原体)山羊亚种(Mycoplasmamycoidesssp.capri)引起的山羊传染病。世界性分布。

潜伏期2~28天,主要症状为体温上升,高者可达41℃,呼吸(家畜)急促,伴有鸣叫声,咳嗽,流鼻涕。孕羊大批流产。急性死亡或转为慢性病。

早期可用抗生素治疗。中国使用氢氧化铝疫苗预防,收到良好效果。

三、猪地方性肺炎

又名猪喘病,由猪肺炎霉形体(M.hyopneumoniae)即猪支原体引起的猪慢性呼吸道传染病。世界性分布。

20世纪50年代中期出现于中国。病原存在于猪呼吸道中,主要经过飞沫或鼻部接触传染。

新发病猪群常出现急性病例,呼吸急促,痉挛性阵咳。多数病猪转为慢性,或渐次恢复,转为隐性型。老疫场的猪一开始即可能呈显慢性型。病猪死亡率不高,但生长缓慢,饲料报酬降低。

病变主要在肺部,结合流行病学和症状可作出诊断。亦可用X射线透视检查(见彩图)。血清学诊断有补体结合试验、间接血凝试验和酶联免疫吸附测定等方法。

土霉素、卡那霉素有治疗效果。此外,还有由猪鼻霉形体引起的关节炎和多发性浆膜炎,以及由猪滑液霉形体引起的关节炎等。

四、鸡的支原体病

禽支原体有19个血清型(A-S),其中鸡支原体(mycoplasma),又称鸡霉形体,是一种顽固的病原体,单独感染常引起鸡的慢性呼吸道病和关节炎;如与其它病原如大肠杆菌、传染性支气管炎病毒或新城疫病毒混合感染常引起鸡的呼吸道疾病综合征,主要有败血支原体(Mycoplasmagallisepticum,MG,也叫鸡毒支原体)和滑液囊支原体(Mycoplasmasynoviae,MS),另外还有其它致病力较低的支原体如火鸡支原体(Mycoplasmameleagridis,缩写MM)、衣阿华支原体、雏鸡支原体和禽支原体等。

鸡以4-8周龄最易感,火鸡多见于5-16周龄,纯种鸡较杂交鸡严重,成年鸡常为隐性感染。

鸡支原体(霉形体)病流行于世界各地的养鸡场,根据流行病学调查,感染率平均为70—80%。各种年龄的鸡均可被感染,但成年鸡较幼龄鸡的抵抗力高;不同品种的鸡抵抗力可能相似。除了某些SPF鸡场外,可以说任何鸡场都受到支原体感染的困扰。除鸡外,很多禽(鸟)类也可感染不同的支原体株,但这些禽类在鸡支原体病发生中的作用尚不完全清楚。

中国上世界80年代陆续出现支原体污染问题,年中国兽药监察所宁宜宝和冀锡霖()在14批鸡胚培养制造的10批活病毒疫苗中分离到了霉形体(支原体)。它们属于鸡源的鸡毒霉形体(支原体)和滑液霉形体(支原体)。并证明这些污染的霉形体(支原体)来自制苗的鸡胚。由此推想,由鸡胚原代或次代细胞培养制造的活疫苗以及来自动物脏器的原代或次代细胞培养制做的活疫苗也存在着受到霉形体污染的可能。年全国第三次生物制品技术研讨班上,宁宜宝、李慧娇等对支原体的生物制品污染以及种鸡和商品代蛋鸡支原体带毒状况做了专题讲座,提出了要高度警惕生物制品支原体污染,报告了种鸡和商品鸡支原体污染调查情况,依据调查结果对种鸡母源垂直传播可能造成的生产灾难给予警告,从这个时候起,农业部逐步规范了生物制品用蛋标准,要求疫苗制造企业要逐步过渡到SPF蛋,当时全国只有2家SPF种鸡:中监所一栋,上海一栋,其中一栋也发生过污染,种鸡场支原体污染根本没有人重视。下边就鸡支原体病的2个主要类型分述如下:

(一)鸡毒支原体(霉形体)(M.gallisepticum)

主要感染鸡与火鸡,可经蛋传播给仔鸡,也可经接触传播给同群鸡。世界性分布。

鸡以气管炎和气囊炎为特征;火鸡以窦炎和气囊炎为特征。

实验感染时潜伏期为1~周。症状为流鼻涕、咳嗽和呼吸时有罗音,可因不良外界环境而加重,火鸡的一侧或双侧眶下窦常有肿胀。发病后雏鸡的弱雏率增加10%;死淘率上升10-20%;蛋鸡的产蛋率通常维持在低水平,几十天或几个月不发生变化,下降10%严重时20-0%;种蛋孵化率降低10-21%;饲料转化率降低21%;肉鸡的体重降低8%,出栏时间延长;

单纯感染鸡毒(败血)支原体仅能引起轻微的气囊炎症,表现为气囊混浊、增厚,上面附着泡沫样物或干酪样物;气管、支气管内有粘液性液体或卡他性分泌物。若混合感染大肠杆菌,则病变相当严重,表现为肝周炎、气囊炎和心包炎,囊腔中有大量黄白色纤维素样渗出物。眶下窦肿胀,内有大量干酪样渗出物。输卵管的病变常常不易察觉。

诊断可采用快速玻片凝集试验、试管凝集试验和血凝抑制试验等方法。

在7日龄接种半量鸡毒支原体灭活苗、60日龄和日龄左右分别接种支原体灭活苗1头份,可大大降低鸡毒(败血)支原体垂直传播的比例。也可采用活苗接种,活苗可有效预防支原体感染呼吸道,但对垂直传播的控制尚不理想。常用的支原体苗为F株、TS-11株等。F株的致病力非常轻微,与新城疫等疫苗联合应用也不会产生干扰现象,免疫保护率达85%。

治疗可用抗生素,如链霉素20万单位/只和四环素10单位/千克体重等注射,5-6周青年鸡链霉素5-8万单位/只,四环素5单位/千克体重肌注,每日一次,2-天即可治愈;或加在饮水或饲料中饲配制替米考星(克/吨)、酒石酸泰乐菌素(-克/吨)、泰妙菌素(-克/吨)、壮观霉素(克/吨)、北里霉素(-克/吨)用于治疗5-7天,效果很好。

治疗时首次药量一定要加倍,以后可使用维持剂量;其次,药物治疗的疗程一定要够,否则,容易复发;第三,在治疗时一定要控制环境温度和通风,尽量降低发生呼吸道病的诱因。

肉鸡对支原体是最敏感的,在整个生长期中都容易发生慢性呼吸道病或呼吸道疾病综合征,给肉鸡养殖户造成巨大经济损失。一方面是由于雏鸡质量问题,另一方面可能饲养环境太差,在10日龄以前就发生早期感染,这样在首次免疫传染性支气管炎、新城疫后即可发病。因此,雏鸡饮水或饲料中添加某些抗支原体药物是必需的。添加的药物有替米考星、酒石酸泰乐菌素、泰妙菌素、北里霉素等。这些药物可以在整个生长期添加,也可在某些发病率较高的时期(如首次接种呼吸道或病毒疫苗前、气温突然变化的前后、更换饲料的前后等)添加。

清除种蛋支原体方法:在种蛋入孵前用0.04%-0.1%红霉素溶液浸泡种蛋15-20分钟;或种蛋孵化前作高温处理,将室温条件下的种蛋在一个加压空气的孵化器内加温,蛋内温度上升到46.1℃,持续12h后,20min内降至7℃,转入正常孵化程序。但此法可降低孵化率8%-12%。此二法也可并用。

对已经污染的种鸡,在开产前和产蛋期间添加药物治疗,可一个月注射一次链霉素,成鸡每次10单位,5-6周青年鸡5-8万单位,饲料中拌饲替米考星(克/吨)、泰乐菌素(-克/吨)或土霉素(0-克/吨),并检疫,淘汰发病鸡,保证种群健康。雏鸡出壳后用链霉素单位/毫升喷雾或链霉素0单位/只滴鼻。

培养无支原体种鸡群是净化支原体最好的方案,主要措施是从60-日龄对育成种鸡净化,通过连续药物治疗和检疫,淘汰带菌鸡,保证种群无污染;二是加强环境、用具、孵化环节消毒,隔离外来污染,确保厂区生物安全,做到环境、种群安全、净化、无污染。

鸡支原体病的预防必须采取综合性措施,单靠某一种措施不能取得理想效果。而疾病的的预防要比治疗有效得多,因为一旦发病,往往是混合性的感染,没有药物对支原体和大肠杆菌以及其它病毒性病原同时有效。

(二)滑液支原体(霉形体)(M.synoviae)。

鸡和火鸡都可由蛋感染,或经过接触传播。潜伏期10~20天。症状有两类,一以跛行为特征,一为呼吸道型。也可能两种兼有,而以跛行最为常见。

滑液囊支原体呼吸道和气囊的病变相对较轻,仅表现轻微的炎症;而关节的病变较重,表现为腱鞘炎、滑膜炎和关节炎,开始时水肿、有渗出物,外观附关节、趾关节肿胀,内有清亮、混浊或奶油状的液体。引起关节、腱鞘的滑膜炎症,引起飞节及趾关节肿大,出现跛行、卧地等症状;有的菌株也可引起气囊炎,并产生呼吸道症状。严重的伴有全身症状,如精神萎顿,生长缓慢,可能出现腹泻等。

出现关节炎症状时,关节液增多,呈清亮、混浊或奶油状。剖检时患部关节滑液膜上可看到有粘稠乳酪样灰白色渗出物,甚至呈干酪样变化。

诊断可用快速玻片凝集试验、试管凝集试验和血凝抑制试验等方法。

治疗时参照鸡毒支原体方法治疗。

预防可使用滑液囊支原体油疫苗(MS)接种。

附:常用抗支原体药物最小抑菌浓度(MIC值)(μg/ml)药品鸡毒支原体泰妙菌素0.-0.泰岳菌素0.06-6.2替米考星0.强力霉素0.2林可霉素2-4恩诺沙星0.5北里霉素红霉素一品佳园




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